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利用LUMiSizer评估高压均质对脂质体囊泡稳定性的影响
发布时间:2022/12/26   点击:827

核心词:稳定性分析

൩发展历程:本实验采用传统(tong)薄膜(mo)水化法辅助高(gao)压均质(zhi)(zhi)制(zhi)备(bei)脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti),考(kao)察均质(zhi)(zhi)压力、均质(zhi)(zhi)次数和胆固(gu)醇含量(liang)对脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)囊泡(pao)物理稳定性的影响。

 

 

脂质体的(de)(de)同时享有包埋(🌠mai)脂可(ke)可(ke)溶(rong)性和水可(ke)可(ke)溶(rong)性活(huo)性氧(yang)酶酶类(lei)有机物(wu)的(de)(de)的(de)(de)能力,明显改善了(le)活(huo)性氧(yang)酶酶类(lei)有机物(wu)的(de)(de)传(chuan)播(bo)有效率,其在(zai)肉制品(pin)实业(ye)各个(ge)领域中的(de)(de)理论研究深受(shou)越变越快(kuai)的(de)(de)加关注。在(zai)磷脂诱发生不(bu)能逆的(de)(de)防氧(yang)化溶(rong)解和脂质体囊泡集结沉(chen)降等現象,最易引发被包埋(mai)活(huo)性氧(yang)酶酶类(lei)有机物(wu)的(de)(de)渗(shen)漏,明显减少了(le)脂质𝔍体在(zai)肉制品(pin)实业(ye)中的(de)(de)使用。

近年(nian)来已经(jing)学(xue)习再生采用明胶、核高(gao)(gao)蛋白、壳聚(ju)糖(tang)下列(lie)关于衍生物(wu)(wu)学(xue)物(wu)(wu)等美(mei)食(shi)生꧙物(wu)(wu)学(xue)大原子(zi)核化(hua)(hua)学(xue)物(wu)(wu)质(zhi)(zhi)(zhi)对脂质(zhi)(zhi)(zhi)体(ti)膜表层(ceng)做出绘制,才能提(ti)(ti)供自己(ji)(ji)其数学(xue)化(hua)(hua)学(xue)相(xiang)对稳(wen)(wen)定(ding)可(ke)靠(kao)量(liang)分(fen)(fen)析高(gao)(gao)性(xing)。但新(xin)(xin)壳层(ceng)材料(liao)的(de)(de)引进提(ti)(ti)供自己(ji)(ji)了美(mei)食(shi)脂质(zhi)(zhi)(zhi)体(ti)的(de)(de)产(chan)量(liang)料(liao)工费(fei),可(ke)使(shi)制法新(xin)(xin)工艺也变得更加僵化(hua)(hua),经(jing)营规模性(xing)化(hua)(hua)的(de)(de)产(chan)业(ye)化(hua)(hua)的(de)(de)产(chan)量(liang)最易因(yin)主设备的(de)(de)受限引起厂品质(zhi)(zhi)(zhi)保证量(liang)不(bu)比较好。一同决定(ding)到(dao)饮食(shi)营养(yang)热量(liang)经(jing)常性(xing)过多(duo)吃对人们的(de)(de)应响,如此设定(ding)脂质(zhi)(zhi)(zhi)体(ti)中热量(liang)的(de)(de)剂量(liang),以求(qiu)取得相(xiang)对稳(wen)(wen)定(ding)可(ke)靠(kao)量(liang)分(fen)(fen)析高(gao)(gao)性(xing)优(you)良(liang)且热量(liang)对比占比略低的(de)(de)脂质(zhi)(zhi)(zhi)体(ti)是本(ben)学(xue)习的(de)(de)基本(ben)需(xu)求(qiu)。各(ge)类(lei)髙压均质(zhi)(zhi)(zhi)法算作(zuo)乳(ru)剂推送(song)系统(tong)实用的(de)(de)粉碎流程搅拌制法的(de)(de)方式,对提(ti)(ti)供自己(ji)(ji)乳(ru)剂的(de)(de)数学(xue)相(xiang)对稳(wen)(wen)定(ding)可(ke)靠(kao)量(liang)分(fen)(fen)析高(gao)(gao)性(xing)有非常重要(yao)帮助,近年(nian)来已在产(chan)业(ye)化(hua)(hua)的(de)(de)化(hua)(hua)产(chan)量(liang)在大中城市经(jing)营规模性(xing)使(shi)用;所以在产(chan)业(ye)化(hua)(hua)的(de)(de)化(hua)(hua)产(chan)量(liang)中再生采用各(ge)类(lei)髙压均质(zhi)(zhi)(zhi)法纪法美(mei)食(shi)脂质(zhi)(zhi)(zhi)体(ti)兼具(ju)具(ju)体(ti)使(shi)用的(de)(de)会。

本调查运用(yong)常用(yong)bopp薄(bo)膜水化(hua)法辅助制作(zuo)进行高压均(jun)质(zhi)化(hua)学(xue)合(he)成(cheng)脂质(zhi)体,多方位考察均(jun)质(zhi)学(xue)习压力、均(jun)质💛(zhi)频繁和(he)高密度脂蛋(dan)白量对脂质(zhi)体囊泡物理学(xue)保持稳判定的关(guan)系(xi)。

 

1. 原料和做法

1.1 超高压均质法治备脂质体

采用(yong)(yong)薄膜水化结合高(gao)(gao)压(ya)均质(zhi)(zhi)法(fa)制(zhi)备脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)。准(zhun)确称取1g大(da)豆卵(luan)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)和适量的(de)胆(dan)固醇(chun),用(yong)(yong)25 mL的(de)CHCl3将(jiang)其全(quan)部溶(rong)解,40 ℃条件(jian)下利用(yong)(yong)真空(kong)旋转(zhuan)蒸(zheng)发(fa)仪减压(ya)蒸(zheng)发(fa)除去CHCl3,待有机相在圆(yuan)底烧(shao)瓶(ping)底部形成薄膜后加入100 mL PBS(0.05 mol/L、pH 7.0),利用(yong)(yong)超声水浴将(jiang)磷脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)膜洗(xi)脱(tuo),制(zhi)成粗(cu)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)混(hun)(hun)悬液。利用(yong)(yong)高(gao)(gao)速剪切仪将(jiang)粗(cu)脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)混(hun)(hun)悬液高(gao)(gao)速剪切分散(san)1 min(10 000 r/min),最后经由高(gao)(gao)压(ya)均质(zhi)(zhi)机分别在20~80 MPa条件(jian)下🌳循环均质(zhi)(zhi)1~6 次得(de)到脂(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)制(zhi)剂。

 

1.2 SLN高中物理平衡性分享

使用 LUMiSizer®进行(xing)测(ce🐈)试(shi)(shi),转速:4000 rpm、测(ce)试(shi)(shi)时(shi)长:2h,时(shi)间间隔:20 s、温度:25 ℃。以(yi)不(bu)稳定性指数(shu)随时(shi)间变化曲线(xian)以(yi)表(biao)示样品在测(ce)试(shi)(shi)过(guo)程中的(de)失(shi)稳状(zhuang)态,不(bu)稳定性指数(shu)越高代表(biao)体系越不(bu)稳定,反之(zhi)乳状(zhuang)液稳定。

 

2. 数据与深入分析

2.1 均质压力值对脂质体相对稳定量分析的影响到

 

2.png


     图1 不同(tong)均质(zhi)压力(li)制备的脂质(zhi)体透(tou)光率图谱(A♋)及不稳定(ding)性指数(shu)随(sui)时间(jian)的变化曲线(B)



从图1A透(tou)光率图谱中可(ke)以(yi)看出,20 MPa和30 MPa处(chu)理(li)后(hou)的(de)脂(zhi)质体(ti)经2 h测试(shi)后(hou),样(yang)(yang)品(pin)整体(ti)的(de)透(tou)光率均有(you)所增(zeng)大,且不稳(wen)(wen)定(ding)(ding)系数随时间(jian)的(de)延(yan)长而显著增(zeng)大,说明(ming)脂(zhi)质体(ti)的(de)物理(li)稳(wen)(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)相对较差。其中30 MPa处(chu)理(li)样(yang)(yang)品(pin)离(li)心前后(hou)的(de)透(tou)光率变(bian)化最大,与(yu)其粒(li)(li)(li)(li)径(jing)(jing)(jing)(jing)和PDI增(zeng)大的(de)结果一致(zhi),脂(zhi)质体(ti)因(yin)更容易发(fa)生聚集(ji)沉淀而导致(zhi)物理(li)稳(wen)(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)降(jiang)低(di)。均质压(ya)力高(gao)于40 MPa时,脂(zhi)质体(ti)样(yang)(yang)品(pin)在测试(shi)过程(cheng)中的(de)透(tou)光率几乎无明(ming)显变(bian)化,且不稳(wen)(wen)定(ding)(ding)系数的(de)变(bian)化幅度也降(jiang)低(di),说明(ming)脂(zhi)质体(ti)粒(li)(li)(li)(li)径(jing)(jing)(jing)(jing)的(de)降(jiang)低(di)对样(yang)(yang)品(pin)物理(li)稳(wen)(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)的(de)提高(gao)有(you)促(cu)进作用(yong)。结合粒(li)(li)(li)(li)径(jing)(jing)(jing)(jing)和PDI的(de)数据(ju),发(fa)现脂(zhi)质体(ti)整体(ti)粒(li)(li)(li)(li)径(jing)(jing)(jing)(jing)与(yu)样(yang)(yang)品(pin)物理(li)稳(wen)(wen)定(ding)(ding)性(xing)(xing)有(you)直接关(guan)系,降(jiang)低(di)脂(zhi)质体(ti)的(de)粒(li)(li)(li)(li)径(jing)(jing)(jing)(jing)可(ke)提高(gao)其在室温条件(jian)下的(de)贮藏稳(wen)(wen)定(ding)(ding)性(xing)(ไxing)。

 

2.2 均质频繁对脂质体稳定可靠性的后果

 

3.jpg

 

图(tu)2 不同均质次数制(zhi)备的脂质体透光率图(tu)谱(A)及不稳(wen)定性(xing)指数随时间的变化🌱(hua)曲线(B)

 

由(you)图(tu)2可知,在考察不同均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)次数(shu)处(chu)理(li)后(hou)(hou)脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)的(de)(de)(de)物(wu)(wu)理(li)稳(wen)定(ding)性时发现,无(wu)(wu)高(gao)压(ya)(ya)均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)处(chu)理(li)的(de)(de)(de)脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti),其(qi)物(wu)(wu)理(li)稳(wen)定(ding)性极差。经(jing)过高(gao)压(ya)(ya)均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)处(chu)理(li)后(hou)(hou),脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)的(de)(de)(de)物(wu)(wu)理(li)稳(wen)定(ding)性显著提(ti)(ti)高(gao)。但在50 MPa均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)压(ya)(ya)力下,经(jing)不同均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)次数(shu)形成的(de)(de)(de)脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)样(yang)品(pin)的(de)(de)(de)透光率无(wu)(wu)显著变化(hua),说(shuo)明提(ti)(ti)高(gao)均(jun)(jun)质(zh💮i)(zhi)次数(shu)对๊脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)的(de)(de)(de)物(wu)(wu)理(li)稳(wen)定(ding)性无(wu)(wu)显著影响(xiang)。综合不同均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)压(ya)(ya)力的(de)(de)(de)实验结(jie)果,当高(gao)压(ya)(ya)均(jun)(jun)质(zhi)(zhi)形成脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)的(de)(de)(de)粒径低于150 nm时,脂(zhi)(zhi)质(zhi)(zhi)体(ti)(ti)样(yang)品(pin)在测试过程(cheng)中的(de)(de)(de)物(wu)(wu)理(li)稳(wen)定(ding)性无(wu)(wu)明显差异(yi)。

 

2.3 m(大豆(dou)卵磷(lin)脂):𒆙m(胆固醇(chun))对脂质(zhi)体稳(wen)定(ding)性ꦺ的影响

 

4.jpg

 

图3 不同大豆✤卵磷脂(zhi)于胆固(g♊u)醇质(zhi)量比制备(bei)的脂(zhi)质(zhi)体(ti)透光率(lv)图谱(A)

及不(bu)稳定性(xing)指数随时(shi)间的(de)变化曲(qu)线(B)


由图3可知,m(大豆卵磷脂)∶m(胆固醇)=2∶1脂质体的物理稳定性最差,说明过多胆固醇的载入不利于高压均质后脂质体物理稳定性的提高,而适量胆固醇的载入对其物理稳定性无显著影响。从不稳定系数曲线的局部放大图中可以发现,当m(大豆卵磷脂)∶m(胆固醇)从10∶1降低至3∶1🍎时,曲线变化的斜率逐渐降低,说明适当提高磷脂膜中胆固醇的相对含量对高压均质脂质体物理稳定性的提高有促进作用。

 

3. 实验结论

(1)增加均(jun)质压力和(he)均(jun)质次数可显(xian)(xian)著提高(gao)脂质体(ti)囊泡的物理稳(wen)定性(xing),但均(jun)质压力和(he)均(jun)质次数分别高(gao)于50 MPa和(he)3 次后,脂质体(ti)囊泡物理稳(wen)定性(xing)的提高(gꦿao)效果不再显(xian)(xian)著。

(2)m(大豆卵磷脂)∶m(胆固醇)=3∶1对未来利用高压均质法制备包埋有活性物质的脂质体在提高样ဣ品稳定性上有一定的参考价值。

(3)LUMiSizer分散体(ti)系分析(xi)仪,应用STEP技术(shu),对配方(fang)稳定(ding)性分析(xi)提(ti)供(gong)了快捷(jie)有效的工具。不(bu)仅可以同(tong)时检测(ce)(ce)12个样品,而且(qie)多波(bo)长(近红外865nm、蓝光🎃410nm)覆(fu)盖多品类样品的测(ce)(ce)试,为用户可提(ti)供(gong)更(geng)多更(geng)深入的分析(xi)信息(xi),极大(da)提(ti)高了工作效率(lv)。

 

转(zhuan)摘自:LUM测(ce)量仪器

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